关于蓝白斑筛选的遇到的问题我用的是DH5α甘油菌和PUC19做蓝白斑筛选,做了几次实验,(培养基是LB固体培养基,内含氨苄抗生素,等凝固之后在表面涂上X-gal和IPTG,涂好后且在一天内使用,不会久

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 21:28:27
关于蓝白斑筛选的遇到的问题我用的是DH5α甘油菌和PUC19做蓝白斑筛选,做了几次实验,(培养基是LB固体培养基,内含氨苄抗生素,等凝固之后在表面涂上X-gal和IPTG,涂好后且在一天内使用,不会久

关于蓝白斑筛选的遇到的问题我用的是DH5α甘油菌和PUC19做蓝白斑筛选,做了几次实验,(培养基是LB固体培养基,内含氨苄抗生素,等凝固之后在表面涂上X-gal和IPTG,涂好后且在一天内使用,不会久
关于蓝白斑筛选的遇到的问题
我用的是DH5α甘油菌和PUC19做蓝白斑筛选,做了几次实验,(培养基是LB固体培养基,内含氨苄抗生素,等凝固之后在表面涂上X-gal和IPTG,涂好后且在一天内使用,不会久存),发现克隆细胞没有蓝斑只有白班,我开始以为是连接效率很高以致无自连质粒菌,但是后来拿空质粒转化这个甘油菌,居然也只有白斑没有蓝斑.放在4度冰箱显色几个小时没有变化.这就很奇怪了,按道理来说应该全部是蓝斑才是.请问到底哪里出了问题呢?是实验设计不对么?
最后补充一点,那个试剂应该是没有问题的.我新买的,尤其是质粒从不同公司买了两次新的.

关于蓝白斑筛选的遇到的问题我用的是DH5α甘油菌和PUC19做蓝白斑筛选,做了几次实验,(培养基是LB固体培养基,内含氨苄抗生素,等凝固之后在表面涂上X-gal和IPTG,涂好后且在一天内使用,不会久
首先X-gal要避光保存,以免失效;其次培养时间确定够吗?我们前两天做的,也全是白斑,又培养了四个小时,总共20h,就有蓝斑出现了(我用的是大肠杆菌)

是不是培养时间太短了,所以分辨不清是蓝色或者是白色?
或者是被紫外灯照到,X-Gal被分解了?

关于蓝白斑筛选的遇到的问题我用的是DH5α甘油菌和PUC19做蓝白斑筛选,做了几次实验,(培养基是LB固体培养基,内含氨苄抗生素,等凝固之后在表面涂上X-gal和IPTG,涂好后且在一天内使用,不会久 蓝白斑筛选问题!蓝白斑筛选重组子时首先是氨苄筛选,其次是半乳糖苷酶活性筛选.感受态细胞中应该也有质粒,而且应该也有氨苄抗性标记,而且感受态如DH5α的半乳糖苷酶应该是失活的,那么 蓝白斑筛选 没有白斑我的蓝白斑筛选,做好了,之后为什么只有蓝斑,没有白斑呢?郁闷那您看,我是不是应该把连接体系变一下呢? 做蓝白斑筛选为什么不长菌?最近做蓝白斑筛选时,平板上一点菌落都没有长出来,不知道什么原因.操作过程应该问题不大,已经成功做过很多次.怀疑是感受态的问题,放在-80度保存了二个多月, pet28a作载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选,酶切位点是NdeI和XhoI,可以用氨苄青霉素或蓝白斑筛选?貌似没有抗氨苄青霉素基因啊 蓝白斑筛选 实时定量PCR.亮氨酸拉链蓝白斑筛选操纵子还有一题简答题.简述原核生物的复制起始过程. 为什么蓝白斑提取出的质粒做琼脂糖电泳白斑跑得快?第一个为蓝斑,以后全是白斑所提质粒 最近做基因克隆,做蓝白斑筛选时只有白斑,一个蓝斑也没有,而且白斑长的非常密,挑斑摇菌PCR电泳检测啥也没有,我是按实验指导上来做的,载体和感受态细胞都是老师给的,应该没什么问题,请 请问IPTG如何配置?AT克隆蓝白斑筛选用 一学生用蓝白斑做阳性克隆筛选,因为疏忽没有在选择性培养基中添加X-gal,结果长出的菌斑全为白色试问:(1)这些白斑是否全为阳性克隆,形成白斑的原理是什么?(2)如果不是,如何从这些 请详述乳糖操纵子正负调控机制,并结合此机制解释基因重组技术中蓝白斑筛选的原理. 蓝白筛选只有白斑我所做的蓝白筛选完全按照试剂盒所述来做的,X-GAL也是新配制的,并且严格避光保存了,为什么做出来一个蓝色的斑都没有呢?IPTG加了,前几天做的时候还是有蓝斑的 蓝白斑筛选中的蓝斑是什么?是载体自连产物吗? 蓝白斑筛选假阴性为什么蓝白斑筛选会出现假阴性 为什么卡那霉素抗性基因大多用于植物转基因,动物转基因可以用它吗我做鱼生长激素克隆,要将cDNA的PCR产物转到大肠杆菌中保存,用卡那霉素筛选好还是利用Amp / IPTG/X2Gal平板上进行蓝白斑筛 奶牛毛色黑白是显性性状,产奶量高,隐形的红白斑奶牛产奶量低现要鉴定一头黑白斑公牛是否是纯合子,最好选用交配的母牛是纯种黑白斑 杂种黑白斑 纯种红白斑 杂种红白斑 蓝白斑筛选培养基怎么配啊?新手